使用液相色譜儀容易出現哪些問題,液相色譜儀常見問題分析[熱點推薦]
使用液相色譜儀容易出現哪些問題?液相色譜儀是實驗室中的精密儀器之一,既然是精密儀器,對于它的使用就需要格外小心,為了能夠有效的使用液相色譜儀,我們要知道液相色譜儀容易出現哪些問題,那么使用液相色譜儀容易出現哪些問題?下面就給大家詳細介紹一下。
液相色譜儀使用時常見問題如下:
使用后沒有及時清洗泵
流動相不應含有任何腐蝕性物質,含有緩沖液的流動相不應保留在泵內,尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下。如果將含緩沖液的流動相留在泵內,由于蒸發或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環和柱塞等。因此,必須泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
流動相走空
泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完,否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環,最終產生漏液。
沒有流動相流出,又無壓力指示怎么辦?
可能是泵內有大量氣體,這時可打開泄壓閥,使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉,將氣泡排盡,也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環磨損,需更換。
壓力和流量不穩了?
原因可能是氣泡,需要排除;或者是單向閥內有異物,可卸下單向閥,浸入丙酮內超聲清洗。有時可能是砂濾棒內有氣泡,或被鹽的微細晶?;蜃躺奈⑸锊糠侄氯?,這時,可卸下砂濾棒浸入流動相內超聲除氣泡,或將砂濾棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)內迅速除去微生物,或將鹽溶解,再立即清洗。
梯度洗脫的流動相選擇不當
要注意溶劑的互溶性,不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相。有些溶劑在一定比例內混溶,超出范圍后就不互溶,使用時更要引起注意。當有機溶劑和緩沖液混合時,還可能析出鹽的晶體,尤其使用磷酸鹽時需特別小心。
忽略的空白梯度洗脫
梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高,以保證良好的重現性。進行樣品分析前必須進行空白梯度洗脫,以辨認溶劑雜質峰,因為弱溶劑中的雜質富集在色譜柱頭后會被強溶劑洗脫下來。用于梯度洗脫的溶劑需徹底脫氣,以防止混合時產生氣泡。
忽略了溶劑混合所帶來的粘度變化
混合溶劑的粘度常隨組成而變化,因而在梯度洗脫時常出現壓力的變化。例如甲醇和水粘度都較小,當二者以相近比例混合時粘度增大很多,此時的柱壓大約是甲醇或水為流動相時的兩倍。因此要注意防止梯度洗脫過程中壓力超過輸液泵或色譜柱能承受的最大壓力。
以上就是液相色譜儀使用時的注意事項,我們在只用種類儀器時一定要搞清楚這些儀器的注意事項,這樣在使用時才不會出現意外,即使出現了,也能夠自己解決。如需繼續了解液相色譜儀相關消息或者更多相關資訊,歡迎閱讀《采購液相色譜儀需要注意什么,實驗室儀器廠家教你選購方法[采購指南]》。
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